ПОЛУЧЕНИЕ ПРОТОПЛАСТОВ ОБЛЕПИХИ (HIPPOPHAE RHAMNOIDES L.)

M. V. Skaptsov, S. V. Smirnov, M. G. Kutsev

Аннотация


Целью исследований стало изучение влияния способа выделения протопластов на жизне- способность интактных клеток Hippophae rhamnoides L. Основными задачами являлись выделение протопластов H. rhamnoides из каллусной массы комбинацией механического и энзиматического воздействия, а также оценка общего состояния протопластов после выделения и очистки. Объектом исследований стали клетки мезофилла и экспланты мезофилла листа, введенные в культуру in vitro. Предполагается, что значительные повреждения при механическо-энзиматическом способе выделения достигаются не только за счет механических воздействий, но и вследствие выделения полифенольных продуктов жизнедеятельности и распада компонентов клеток. Кроме того, протопласты каллусов являются дедифференцированными и позволяют упростить процесс специализации клеток при проведении различных селекционных и биотехнологических процессов. В результате был установлен оптимальный метод выделения протопластов H. rhamnoides со сниженным уровнем повреждения клеток. Установлено, что важными факторами для максимального выхода протопластов является подбор концентраций D-маннита, выступающего в качестве осмотически активного вещества; подбор концентраций мацерозима R10 и целлюлазы R10; использование тиосульфата натрия в качестве антиоксиданта, а также подбор времени инкубации листовых эксплантов на среде с энзимами.

Полный текст:

PDF

Литература


Бекер М.Е. Биотехнология. – M.: Агропромиздат, 1990. – 451 с.

Бутенко Р.Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнология на их основе: Учебное пособие. – М.: ФБК-ПРЕСС, 1999. – 160 с.

Дрейпер Д., Скотт Р., Армитидж Ф., Уолден Р. Генная инженерия растений. Лабораторное руководство. – М.: Мир, 1991. – 408 с.

Guo J., Morrell-Falvey J., Labbé J.L., Muchero W, Kalluri U.C., Tuskan G.A.,Chen J. Highly efficient isolation of Populus mesophyll protoplasts and its application in transient expression assays // PLOS ONE, 2012. – Vol. 7, № 9. – P. 1–8.

Julsing M.K., Quax W.J., Kayser O. Engineering of medicinal plants – prospects and limitations of medicinal plant biotechnology // Medicinal plant biotechnology – from basic research to industrial. – Weinheim, 2006. – P. 4–8.

Krautwig B., Lorz H. Cereal protoplasts // Plant Science, 1995. – Vol. 111. – P. 1–10.

Lin W., Odell J.T., Schreiner R.M. Soybean protoplast culture and direct gene uptake and expression by cultured soybean protoplasts // Plant Physiol., 1987. – Vol. 84, № 3. – P. 856–861.

Murashige T. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures // Physiol. Plant, 1962. – Vol. 15, № 13. – Р. 473–497.

Stewart С.N.J. Plant biotechnology and genetics: principles, techniques and applications. – New Jersey: John Wiley & Sons, 2008. – 352 p.

Zhu L., Wang B.C., Zhou J., Chen L.X., Dai C.Y., Duan C.R. Protoplast isolation of callus in Echinacea augustifolia // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 2005. – Vol. 44. – P. 1–5.




DOI: http://dx.doi.org/10.14258/turczaninowia.16.3.20

Ссылки

  • На текущий момент ссылки отсутствуют.


Адрес:  656049, Барнаул, пр. Ленина, 61, Алтайский государственный университет. 

Редакция журнала "Turczaninowia".  

Факс: (3852) 67-09-28; Тел.: (3852) 67-09-27, 36-86-39.

Журнал публикуется в издательстве Алтайского государственного университета.

С полным архивом журнала "Turczaninowia" можно ознакомиться на старой версии сайта.

Для настройки уведомлений о появлении новых выпусков журнала "Turczaninowia" на сайте, либо получении актуальной информации, в том числе объявлений, событий процесса отправки, рецензирования и пр., Вы можете воспользоваться модулем настройки уведомлений (справа на главной странице).

ISSN 1560-7259 Print, ISSN 1560-7267 Online

Электронное периодическое издание "Turczaninowia (Турчаниновия)" зарегистрировано как средство массовой информации.

Свидетельство о регистрации СМИ ЭЛ №ФС77-47579 от 30 ноября 2011 г. выдано Роскомнадзором РФ.


All contents licensed under GNU General Public License


© 1998 Turczaninowia